在生物医疗研究中,确保细胞培养基中不含支原体是至关重要的,这不仅关系到细胞培养的健康状况,还影响实验结果的可靠性。为了有效清除培养基中的支原体,下面介绍几种常用的方法:
抗生素治疗
使用抗生素是清除支原体的有效手段。常用的抗生素包括泰乐菌素、林可霉素、壮观霉素、喹诺酮和四环素等。值得一提的是,俄罗斯专享会294推出的MBZellShield®细胞支原体祛除试剂,是一款即用型复合抗生素,专为保护细胞培养体系免受支原体污染而设计。在使用抗生素时,需根据支原体类型与药物敏感性来选择合适的药物,并严格按照药物说明书进行操作。
热处理
将细胞培养基加热至60℃以上能有效杀灭支原体。然而,这种方法会对细胞造成损害,因此仅应在实验结束后或不需要保持细胞活性的情况下使用。
过滤
通过过滤器可以将细胞培养基中的支原体过滤掉,但需注意,此方法可能无法完全清除所有支原体,并且对于小分子支原体的效果也可能不佳。
更换培养基
一旦发现支原体污染,必须立即替换为新的细胞培养基,以防止支原体繁殖并扩展到整个培养体系。
细胞株更换
如果细胞株本身受到支原体污染,立即更换为新的、未受污染的细胞株是必要的措施。
纯化清洗
对于珍贵的细胞,大可采用纯化清洗的方法去除支原体。这通常需要使用PBS或完全培养基对细胞进行多次洗涤,并利用离心力分离细胞与支原体。
预防措施
在培养基开发及细胞培养的过程中,采取预防措施是预防支原体污染的关键。这包括定期消毒实验室环境、培训实验操作人员、以及对培养箱和其他实验设备进行定期维护和检查。综上所述,为了有效清除培养基中的支原体,应综合运用多种方法,并根据具体情况选择合适的技术。同时,确保采取必要的预防措施,以最大限度地降低支原体污染的风险,保护科研成果的有效性。